恩诺沙星是一种广谱抗生素,常用于畜禽养殖业,但其残留可能对人体健康造成危害。恩诺沙星检测ELISA试剂盒因其操作简便、灵敏度高,成为检测残留的常用工具。 一、操作步骤:
样品处理:取待测样品,按说明书要求进行匀浆、离心或过滤,提取目标药物。
加样:将处理后的样品及标准品加入包被有恩诺沙星抗体的微孔板中,孵育使抗原-抗体结合。
洗涤:弃去孔内液体,用洗涤液洗去未结合物质,避免干扰后续反应。
酶标抗体反应:加入酶标记的二抗,与结合的恩诺沙星形成复合物,再次孵育。
显色:加入底物溶液,酶催化显色反应,颜色深浅与恩诺沙星浓度成反比。
终止与读数:加入终止液停止反应,并在酶标仪上读取吸光度值,对比标准曲线计算样品浓度。
二、注意事项:
避免交叉污染:使用干净枪头和容器,防止样品间干扰。
严格按时间控制:每一步孵育和洗涤时间需精准,否则影响结果准确性。
试剂保存:未使用的试剂应避光冷藏,避免反复冻融。
质控管理:建议同时检测阳性/阴性对照,确保实验可靠性。
恩诺沙星检测ELISA试剂盒适用于现场快速筛查,但若需精确数据,建议结合HPLC等仪器方法验证。